Las micotoxinas son sustancias tóxicas producidas mycotoxigenic fungi por hongos micotoxigénicos en productos agrícolas, principalmente cereales.
Desde el punto de vista de la seguridad alimentaria, las micotoxinas más importantes:- Aflatoxinas,
- Ocratoxina A
- Zearalenona
- Fumonisinas
- Tricotecenos
Licenciado en Medicina Veterinaria y Doctor en Ciencias de la Alimentación.
Profesora Asociada, Universitat de Valencia.
Micotoxinas y Cerales
Los cereales constituyen la materia prima principal en la formulación de los piensos,(Santos et al., 2011), por lo que las micotoxinas se han convertido en uno de los grandes retos del sector ganadero, afectando también a otros eslabones de la cadena, como almacenistas, fabricantes y ganaderos.
Figura 1. Exposición a micotoxinas a través de la ingesta en humanos y animales (Tolosa, 2017)
Uno de los problemas de gran interés es la presencia de micotoxinas en piensos, ya que éstas pueden transferirse a tejidos y productos derivados (carne, leche, huevos) de los animales alimentados con piensos contaminados.(Figura 1).
Métodos rápidos de detección
La obligación de aplicar los límites reglamentarios establecidos ha impulsado el desarrollo de técnicas analíticas para el análisis de micotoxinas en alimentos y piensos que cumplan con los sistemas de control y requerimientos de calidad establecidos.
Among the rapid methods are those qualitative or semiquantitative easy to handle methods allowing quick and economic analysis with low instrumental component, primarily used for screening of a large number of samples (González-Sapienza & Venancio, 2011).
La mayoría de los métodos rápidos son ensayos inmunoquímicos basados en el empleo de anticuerpos como elementos de reconocimiento específico de la micotoxina diana, utilizados comúnmente como análisis de rutina en las fábricas de pienso.
Métodos Inmunoquímicos
El principio de funcionamiento de estos métodos es la reacción antígeno-anticuerpo, siendo el antígeno una micotoxina modificada, que una vez producida se convierte en una señal que permite la cuantificación de ésta.
Inmunoensayos
La técnica más empleada es el Ensayo de Inmunoabsorción Ligado a Enzimas (ELISA) competitivo directo (Figura 2), comercializada en forma de kits compuestos de microplacas cubiertas con el anticuerpo de la micotoxina, reactivos y estándares necesarios para realizar el análisis.
Ventajas
Permiten una importante simplificación de la etapa de preparación de las muestras, ya que requieren pequeños volúmenes de muestra y procedimientos de purificación más sencillos.
Método rápido, simple, específico y cuantitativo.
Desventajas
La aparición de reacciones cruzadas con micotoxinas del mismo grupo o las interferencias con la matriz.
Figura 2. Esquema del análisis de micotoxinas mediante ELISA competitivo (Ortiz et al., 2014).
El ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas se basa en la capacidad de un anticuerpo específico para distinguir la estructura tridimensional de una micotoxina determinada.
La técnica requiere de una extracción sencilla de la muestra con un disolvente.
Tras el desarrollo del kit, se genera una reacción colorimétrica inversamente proporcional a la concentración de micotoxina en la muestra, medida por el lector de ELISA a una absorbancia de 450 nm.
Inmunoensayos basados en membranas: Ensayo Flow-through/Lateral flow test
Se trata de un ELISA competitivo directo que consiste en tiras compuestas de un bloque donde se coloca la muestra, otro donde está el conjugado, una membrana, un bloque adsorbente y una base adhesiva, en la que el anticuerpo anti-micotoxina se une a la superficie de una membrana (Figura 3).
Es un método semicuantitativo, muy sencillo, rápido y estable, siendo una técnica muy útil para tomar decisiones a pie de campo o de fábrica.
Figura 3. Ensayo Flow-Through
Extracción mediante columnas de inmunoafinidad
Las columnas de inmunoafinidad han sido comúnmente empleadas por su facilidad de uso y su alta selectividad.
Figura 4. Esquema de empleo de columnas de inmunoafinidad
Métodos instrumentales
Técnicas Cromatografías
Cromatografía líquida de alta resolución
- Sensibles,
- Reproducibles
- Exactos
- Presentan un mayor grado de automatización.
Las técnicas espectrométricas de absorción y emisión más empleadas son la detección ultravioleta (UV) y la fluorescencia (FL), siendo preferible esta última cuando las micotoxinas presentan fluorescencia natural.
Cromatografía de gases(GC)
El principal grupo de micotoxinas analizadas mediante GC son los tricotecenos, obteniéndose límites de detección y coeficientes de variación adecuados previa reacción de silanización (Rodriguez-Carrasco et al, 2012;. Escrivá et al, 2016.).
Prevención de micotoxicosis