Análisis multimicotoxinas avanzado con Agilent 6460c LC-MS/MS

OBJETIVO  

Este abstract presenta un método de análisis y preparación de muestras multimicotoxinas para la detección de micotoxinas emergentes y reguladas por la UE mediante UHPLC-MS/MS Agilent 6460c.

MATERIALES & MÉTODOS  

El método se basa en el principio de “diluir e inyectar” (“dilute and shoot”).

La preparación de la muestra requiere:

• 1. Extracción con un disolvente orgánico.
• 2. Centrifugación de los extractos.
• 3. Para compensar los efectos de matriz en la ionización por electrospray, los extractos se mezclan con patrones internos marcados isotópicamente (9) para cada grupo de micotoxinas.

⇰ La adición del patrón interno se realiza en la aguja del automuestreador, antes de la inyección en el UHPLC-MS/MS.

La validación del método en términos de linealidad, selectividad, sensibilidad, exactitud y precisión se realizó en 8 matrices de piensos complejos (maíz, piensos compuestos, trigo, cebada, harina de soja, salvado de trigo, harina de girasol, ración mixta total) para detectar 34 micotoxinas:

• ⇰ Aflatoxinas B1, B2, G1, and G2
• ⇰ α - zearalenol, β - zearalenol, zearalanona y zearalenona
• ⇰ Diacetoxiscirpenol
• ⇰ Toxin HT-2 y toxina T-2
• ⇰ Neosolaniol
• ⇰ 3-acetil deoxinivalenol, 15- acetil deoxinivalenol, deoxinivalenol y deoxinivalenol-3-glucosido
• ⇰ Nivalenol
• ⇰ Fumonisinas B1, B2, and B3
• ⇰ Ácid fusarico
• ⇰ Moniliformina

• ⇰ Fusarenon X
• ⇰ Ocratoxina A
• ⇰ Beauvericina
• ⇰ Enniatinas A, A1, B y B1
• ⇰ Citrinina
• ⇰ Patulina
• ⇰ Ergosina
• ⇰ Ergocriptinins
• ⇰ Alternariol

Los límites de cuantificación (LOQ) fueron de 0,05 ngmL-1 a 4 ngmL-1.

Las recuperaciones de las 34 micotoxinas detectadas en las 8 categorías de piensos se situaron entre el 65,5% y el 125,7% tras la corrección del patrón interno, con desviaciones estándar relativas (RSD) inferiores al 15,1%.

Los resultados demuestran la robustez de este método para el análisis de 34 micotoxinas mediante LC-MS/MS.

La aplicación de programas de control eficaces y de normativas legales estrictas puede contribuir significativamente a la reducción y arrastre de estas micotoxinas en la cadena alimentaria.

Autores