Análisis de 10 micotoxinas en diferentes matrices agrícolas y de alimentos/piensos mediante LC-MS/MS

En este estudio, se desarrolló y validó un método de análisis multimicotoxinas basado en extracción sólido-líquido (SLE) para el análisis de aflatoxinas (AFB1, AFB2, AFG1, AFG2), deoxinivalenol (DON), fumonisina B1 (FB1), fumonisina B2 (FB2), ocratoxina A (OTA), toxina T-2 y zearalenona (ZEN) en diversas matrices agrícolas (maíz, trigo, cebada, salvado de trigo, soja y semillas de girasol) y matrices de alimentos/piensos (pienso compuesto para cerdos y aves de corral y ración total mezclada para vacas lecheras) utilizando LC-MS/MS Triple Quadrupole (Waters Xevo TQ-XS) en Betagro Science Center, Tailandia.

Las muestras se molieron finamente y se homogeneizaron utilizando un molino de laboratorio, y se pesaron y colocaron en un tubo cónico 2.5 g de muestra.

⇒A este tubo se añadieron 10 ml de mezcla de extracción I (80 % acetonitrilo:19.9 % agua:0.1 % ácido fórmico) y se cerró la tapa.

El tubo se colocó posteriormente en un agitador orbital a 230 revoluciones por minuto (rpm) para una mezcla completa (90 minutos a temperatura ambiente).

A continuación, el tubo se centrifugó a 4000 × g durante 5 minutos a 4 °C, y el sobrenadante se transfirió a otro tubo de 50 ml.

A continuación, se pipetearon 500 µl de sobrenadante y se combinaron con 500 µl de solvente diluyente (50 % acetonitrilo:0.1 % ácido fórmico) en un tubo de 15 ml, y la solución se mezcló mediante vortexado durante 30 s.

Para compensar los efectos de matriz durante la ionización por electrospray, se pipetearon estándares internos mixtos marcados con 13C para aflatoxinas (AFB1, AFB2, AFG1, AFG2), deoxinivalenol (DON), fumonisina B1 (FB1), fumonisina B2 (FB2), ocratoxina A (OTA), toxina T-2 y zearalenona (ZEN) (20 µl) en 1000 µl del extracto contenido en el tubo de 15 ml, y la solución se mezcló mediante vortexado durante 30 s.

Se preparó un total de 1020 µl de líquido filtrando el extracto a través de un filtro de jeringa de membrana en un vial de vidrio para el análisis mediante LC-MS/MS.

Las recuperaciones de 10 micotoxinas adicionadas en matrices de alimentos/piensos y cereales se registraron en un rango de 93,6 %-114,2 % tras la corrección con estándares internos (desviaciones estándar relativas [RSDs] inferiores al 14.2 %).