Efectos y mecanismos
inmunomoduladores
de las micotoxinas en el cerdo

La amenaza de las micotoxinas en los granos en todo el mundo

Las micotoxinas son metabolitos secundarios producidos por hongos (géneros Aspergillus, Penicillium, Fusarium, Alternaria y Claviceps) que pueden encontrarse en los granos (por ejemplo, maíz, trigo, cebada) en todo el mundo.

Estudios recientes han sugerido que hasta el 80% de los cultivos de alimentos y piensos están contaminados con micotoxinas a nivel mundial (ocurrencia por encima de los niveles detectables hasta el 60-80%), mientras que la co-contaminación de los granos con múltiples micotoxinas es un hallazgo común³.

Un estudio de 10 años con muestras de 100 países reveló que el DON, la FB y la ZEN eran las micotoxinas más prevalentes y se detectaron en el 64%, 60% y 45% de todas las muestras, respectivamente. Las concentraciones medias fueron de 723 μg/kg, 388 μg/kg y 55 μg/kg para FBs, DON y ZEN, respectivamente¹.

Los cerdos y las aves de corral son muy susceptibles y sensibles a los efectos de las micotoxinas⁴.

Los efectos de las micotoxinas en los cerdos son múltiples y dependen de⁵:

• ⇰ El tipo de micotoxina
• ⇰ El nivel y la duración de la exposición
• ⇰ La edad del animal

La ingestión de grandes cantidades puede inducir casos agudos de micotoxicosis con síntomas clínicos bien descritos, como^2,4,6:

• Trastornos reproductivos y síndrome de hiperestrogenismo en el caso de ZEN
• Vómitos y retraso del crecimiento en el caso de DON
• Edema pulmonar tras la ingestión de FBs
• Reducción de la ingesta de alimentos y aumento de peso en los casos de AF aguda
• Polidipsia, poliuria y reducción del crecimiento en los casos de OTA

Sin embargo, el consumo crónico de bajos niveles de micotoxinas y la inducción de síntomas clínicos inespecíficos parece más probable en condiciones de campo.

Los efectos tóxicos crónicos de las micotoxinas en los cerdos incluyen hepatotoxicidad, genotoxicidad, nefrotoxicidad, neurotoxicidad, reprotoxicidad, inmunotoxicidad y otros efectos como los trastornos neuroendocrinos^6,7.

El sistema inmunitario del cerdo

El sistema inmunitario del cerdo es el principal mecanismo de defensa frente a los agentes infecciosos y otros agentes. Su respuesta es complicada, pero los aspectos básicos de la respuesta del sistema inmunitario son⁸:

• ✔ Inflamación
• ✔ Respuesta celular
• ✔ Respuesta humoral

De forma resumida, tras la estimulación del sistema inmunitario (por ejemplo, tras el contacto con un agente infeccioso), un primer mecanismo múltiple de defensa entra en acción.

INMUNIDAD INNATA

Este mecanismo incluye la respuesta inmunitaria innata con células fagocíticas y la producción de diversas citoquinas, quimiocinas y proteínas que proporcionan protección antimicrobiana, reclutan linfocitos T a través del proceso inflamatorio y activan aún más la respuesta inmunitaria adaptativa o adquirida.

⇰ El sistema innato también incluye células Natural Killer (NK) que presentan una doble función, una respuesta innata para atacar a las células infectadas por agentes infecciosos y la producción de citoquinas para ayudar a la activación de la inmunidad adquirida^9-11.

⇰ Además, los receptores de reconocimiento de patrones, incluidos los receptores Toll-like (TLR), participan en la monitorización de los patrones moleculares asociados a los patógenos e inducen vías de señalización que permitirán la activación del sistema inmunitario frente a la infección¹¹.

INMUNIDAD ADQUIRIDA

Más adelante, el sistema inmunitario adaptativo utiliza linfocitos B, linfocitos T, citoquinas y anticuerpos con el fin de proporcionar una memoria específica del patógeno para protegerse de infecciones posteriores con el mismo patógeno.

El sistema inmunitario innato – Primera línea de defensa

Hay partes importantes del sistema inmunitario innato que actúan como la primera línea de defensa o «barreras» frente a diferentes tipos de infecciones (físicas, químicas, microbianas), como las células epiteliales, los ácidos grasos bactericidas, la flora normal y la capa de moco, así como las células con capacidades fagocitarias como los leucocitos granulares (neutrófilos, basófilos, mastocitos y eosinófilos) y los fagocitos mononucleares (monocitos de sangre circulante y macrófagos de tejido).

Las células Natural Killer (NK) y otras partes del sistema inmunitario innato, como las defensinas (péptidos de defensa del huésped), el sistema del complemento, los receptores Toll-like (TLR), los interferones de tipo I (IFN), el factor de necrosis tumoral-α (TNF-α), IL-6, y IL-8 (citoquinas proinflamatorias)¹¹:

• ⇰ Defienden frente a los patógenos
• ⇰ Controlan las infecciones
• ⇰ Activan la cascada de eventos de inflamación y la respuesta inmunitaria adaptativa

Las partes que desempeñan un papel importante en este sistema de defensa inmunitaria y en la respuesta frente a los patógenos son el epitelio de las mucosas (por ejemplo, el tracto intestinal y respiratorio), el microbioma (ecosistema microbiano intestinal) y el sistema linfoide porcino compuesto por los ganglios linfáticos, los folículos linfáticos, las amígdalas, el timo y el bazo^12,13.

Adicionalmente, una microbiota óptima¹⁴:

• ✔ Evita la colonización del epitelio intestinal por patógenos y la penetración de la barrera intestinal
• ✔ Modula el tejido linfoide asociado al intestino (GALT) y la inmunidad sistémica
• ✔ Influye en el desarrollo gastrointestinal

Los efectos de las micotoxinas en el sistema inmunitario de los cerdos

Los efectos de las micotoxinas mencionadas anteriormente en los cerdos son múltiples y varían considerablemente.

Teniendo en cuenta que los cerdos ingieren alimentos contaminados con micotoxinas, la capa de células epiteliales gastrointestinales es el primer lugar de contacto e interacción^14,15.

A partir de ese momento, se produce una inmunomodulación y una secuencia de reacciones inflamatorias que pueden ser alteradas por los efectos de la micotoxina a nivel molecular y celular.

Las micotoxinas de Fusarium pueden producir efectos inmunoestimulantes o inmunosupresores, según la edad del huésped, la dosis de exposición y la duración^7,16, mientras que las AFs y la OTA inducen inmunosupresión^17,18.

Las consecuencias sanitarias y económicas de los efectos de las micotoxinas en el sistema inmunitario de los cerdos son significativas. Se han descrito tres resultados principales^19-21:

• ⇰ Mayor susceptibilidad a enfermedades infecciosas
• ⇰ Reactivación de infecciones crónicas
• ⇰ Disminución de la eficacia vacunal

Se ha sugerido una sensibilidad del sistema inmunitario a la inmunosupresión inducida por micotoxinas. Esto se debe a la vulnerabilidad de las células en continua proliferación y diferenciación que participan en actividades mediadas por el sistema inmunitario y que regulan la compleja red de comunicación entre los componentes celulares y humorales⁸.

⇰ Además, cabe señalar que los efectos de la mezcla de micotoxinas presentes en los piensos para cerdos sobre el sistema inmunitario también pueden aumentar la variabilidad del resultado y no pueden predecirse fácilmente, ya que podrían tener una interacción antagónica, aditiva o sinérgica y aumentar el impacto de cada micotoxina²⁰.

El presente artículo se centrará en las evidencias relativas a los mecanismos subyacentes de la inmunomodulación inducida por las micotoxinas.

⇰ Se hace especial referencia a los ensayos con cerdos o líneas celulares porcinas, aunque también se presentan selectivamente pruebas de otros animales de granja, animales de laboratorio y líneas celulares.

⇰ La mayor parte de los hechos relacionados con los efectos de las micotoxinas sobre la eficacia de las vacunas y la susceptibilidad a las enfermedades se presentarán en un artículo específico.

TRICOTECENOS

Los efectos del DON en el sistema inmunitario del cerdo

El DON y otras micotoxinas producidas por Fusarium afectan directamente a la síntesis de globulinas en el hígado y comprometen la respuesta inmunitaria de los cerdos²².

Los tricotecenos de tipo B, incluido el DON, tienen la capacidad aumentar y disminuir las funciones inmunitarias, interrumpiendo la señalización intracelular entre los leucocitos²³.

⇰ Los efectos inmunoestimulantes o inmunosupresores de DON dependen de la dosis, frecuencia y duración de la exposición²⁴, mientras que pocos estudios han demostrado los efectos de 3-Ac-DON, 15-Ac-DON y DON-3-glucósido en la respuesta inmunitaria.

⇰ En cuanto a las formas acetiladas de DON, hay pruebas de que al menos el 15-Ac-DON produce una toxicidad crónica general similar a la del DON, mientras que la inmunotoxicidad del 3-Ac-DON y del 15-Ac-DON podría estar menos expresada²⁵.

Como se ha observado in vivo, los tricotecenos pueden ser estimulantes en algunos modelos de leucocitos, pero inhibidores en otros; paradójicamente, estas actividades a veces se producen conjuntamente²⁶.

Las células inmunitarias (macrófagos, linfocitos B y T y células Natural Killer (NK)) son sensibles a DON, 3-Ac-DON y 15-Ac-DON, y se pueden observar efectos inmunoestimulantes/ inflamatorios o inmunosupresores dosis dependientes^{7,23,24,27,28}.

La expresión genética inflamatoria diferencial y la apoptosis inducida por DON son mecanismos que juegan un papel importante en esos efectos inmunológicos.

La diana molecular más relevante de los tricotecenos es la subunidad ribosómica 60S, lo que sugiere que un mecanismo subyacente es la inhibición de la translocación²⁹.

Sin embargo, se sabe que los tricotecenos y otros inhibidores de la translocación que se unen a los ribosomas también pueden activar rápidamente las proteínas quinasas activadas por mitógenos (MAPK), provocando la expresión de genes relacionados con la inflamación como citoquinas proinflamatorias^23,24, e inducir la apoptosis en un proceso conocido como “respuesta al estrés ribotóxico“^30,31.

Los efectos tóxicos del DON en los animales de granja se han estudiado ampliamente²⁵, siendo los efectos anorexígenos e inmunomoduladores los más pronunciados en los cerdos.

El rechazo y la reducción de la ingesta de alimentos después de la ingestión de pienso contaminado con DON se han asociado con los efectos hormonales e inmunotóxicos de DON, ya que se ha observado que los cambios en las hormonas de la saciedad (por ejemplo, colecistoquinina y péptido tirosina tirosina) y los cambios de las citoquinas proinflamatorias (por ejemplo, IL-1β, IL-6, TNF-alfa) están relacionados con la anorexia inducida por DON²⁵.

⇰ Además, se ha sugerido que el DON afecta predominantemente a las células de proliferación intensa como las células epiteliales intestinales (IEC), el hígado y las células inmunitarias, y el orden de sensibilidad al DON es inmunitario >neuroendocrino> intestinal^7,14.

EFFECTOS INMUNOLÓGICOS DEL DON EN LECHONES

Como se ha descrito anteriormente³⁴, las bajas concentraciones de DON (hasta 840 μg/kg de alimento durante 4 semanas) no afectan a la respuesta inmunitaria de los lechones en lo que respecta a la concentración de inmunoglobulinas, la proliferación de linfocitos y la producción de citoquinas.

• Sin embargo, en otros estudios se ha demostrado que el DON aumenta la concentración de IgA en la sangre, mientras que la proliferación de linfocitos inespecíficos puede aumentar o disminuir^19,35-38.
• Por otro lado, Ferrari et al.³⁹ no demostraron efectos inmunitarios significativos tras 6 semanas de exposición oral a DON en cerdos, confirmando la variabilidad de los efectos inmunitarios de DON.
• Según Frankic et al.³⁷, el DON (4 mg/kg de alimento durante 14 días en cerdos destetados) aumentó significativamente la cantidad de daño en el ADN en los linfocitos en un 28%.

Según Döll y Dänicke⁴⁰, de acuerdo con investigaciones anteriores sobre cerdos, otros animales de granja y humanos, normalmente sólo hay efectos menores (hasta 1,5 veces), insignificantes o ningún efecto del DON sobre la IgA.

EFECTOS HEPATOTÓXICOS DEL DON

En el estudio in vitro (hepatocitos expuestos a 500 o 2000 nm de DON con o sin 1μg lipopolisacáridos (LPS)/ ml; incubación durante 48 horas) de Doll et al.⁴¹, se sugirió que el DON tiene el potencial de provocar y modular las reacciones inmunitarias en las células hepáticas de los cerdos. El estudio aportó pruebas de que:

• ⇰ DON y LPS fueron sinérgicos, aumentando la expresión de ARNm de TNF-α en los hepatocitos.
• ⇰ DON estimuló una inducción dependiente de la dosis de ARNm de IL-6.
• ⇰ Las concentraciones sobrenadantes de IL-6 inducidas por LPS se redujeron significativamente.
• ⇰ La expresión del ARNm de IL-10 antiinflamatoria aumentó.

En un estudio sobre los efectos del DON sobre la respuesta inmunitaria a la vacunación (2,2-2,5 mg DON/kg de pienso, cerdos destetados durante 9 semanas)¹⁹, se observó un aumento de las IgA e IgG específicas de la ovoalbúmina (OVA), mientras que los ganglios linfáticos de los cerdos tratados tenían una expresión reducida del ARNm de TGF-β y de IFN-γ, lo que respaldaba la posibilidad de una reducción de la respuesta a la vacunación inducida por el DON.

La toxina tuvo un efecto bifásico sobre la proliferación de linfocitos específicos de OVA, sugiriendo un aumento en los días posteriores a la inmunización con OVA, pero una disminución en las semanas siguientes.

Otro estudio en cerdos inmunizados con OVA mostró un aumento de los títulos de IgG anti-OVA después de 42 días de exposición a una dieta contaminada con DON.

⇰ Simultáneamente, se incrementó la expresión de las quimiocinas implicadas en las reacciones inflamatorias [(IL-8, quimiocina (motivo C-X-C) ligando 20 (CXCL20), interferón-g (IFN-g)].

⇰ El desoxinivalenol aumentó la expresión del gen del antioxidante glutatión peroxidasa 2 (GPX-2) y redujo la expresión de los genes que codifican los antioxidantes enzimáticos, incluyendo GPX-3, GPX-4 y la superóxido dismutasa 3 (SOD-3), involucrados en el estrés oxidativo⁴².

⇰ También se observó una respuesta reducida o retardada de los anticuerpos a los antígenos dependientes del timo en cerdos en crecimiento alimentados con granos contaminados con DON^22,43.

EFECTOS EN MACRÓFAGOS

El macrófago y el sistema inmunitario innato parecen ser sensibles a los tricotecenos^{26, 44}. Se considera que los macrófagos son células con una mayor (10 a 100 veces) sensibilidad al DON en comparación con los fibroblastos, linfocitos, IEC o astrocitos.

Basándose en algunas hipótesis, el aumento de la sensibilidad puede atribuirse al aumento de la capacidad de DON para entrar en los macrófagos o al aumento de la apoptosis de los macrófagos tras la activación inducida por DON de la vía JAK/STAT^4,45.

↓DON

La exposición a bajas dosis de DON resulta en:

⇰ Estimulación y activación de macrófagos (macrófagos humanos, de ratones, murinos y porcinos).

⇰ Secreción de citoquinas inflamatorias (IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6 y TNFα).

⇰ Expresión de las proteínas intracelulares COX-2 e iNOS (activación selectiva de la ERK, NFκB y de la proteína activadora-1)^24,36,46-48, de la sintasa de óxido nítrico⁴⁹ y de numerosas quimiocinas^50,51.

↑DON

La exposición a altas DON dosis de DON induce efectos supresores de procesos relacionados con los macrófagos, como la secreción de citoquinas y la fagocitosis, e induce su apoptosis (mediante la activación de la quinasa p38), con lo que aumenta la susceptibilidad del huésped a los patógenos y reduce la activación de los linfocitos B y T (los macrófagos no actúan como células presentadoras de antígenos)^52-54.

Sin embargo, los estudios en macrófagos porcinos primarios evidencian la falta de activación de la COX-2 y la IL-6 por el DON en los macrófagos porcinos, lo que sugiere un modo de acción distinto en esta especie³⁶.

EFECTOS SOBRE LAS CÉLULAS DENDRÍTICAS

La modulación de la función de las células dendríticas (CD) probablemente contribuye a los efectos inmunosupresores inducidos por el DON. La investigación in vitro e in vivo reveló la interacción entre DON y CD.

Los hallazgos tras alimentar a los cerdos con 5,3 ppm de DON en el pienso durante 5-11 semanas (in vivo) y/o tras el tratamiento de 100-800ng/mL de DON de DC derivado de monocitos (in vitro), incluyeron⁵⁵:

• ⇰ Disminución de la actividad endocítica
• ⇰ Inhibición de la secreción de IL-10
• ⇰ Deterioro de la capacidad de las CD para la captación de antígenos

Los efectos del DON en el intestino de los cerdos han sido bien descritos por Pinton y Oswald⁵⁶, sugiriendo múltiples efectos negativos sobre la integridad del epitelio y la barrera intestinal, así como la modulación de la actividad del epitelio intestinal en su papel en la respuesta inmunitaria, afectando la producción de citoquinas por las células intestinales o inmunitarias, y se supone que interfieren con el cruce entre las células epiteliales y otras células inmunitarias intestinales.

Cano et al.⁵⁷, investigaron los efectos in vitro del DON purificado [IPEC-1 porcino y explantes yeyunales porcinos (modelo ex vivo)], y sugirieron que el DON puede:

• ⇰ Potenciar la expresión de genes relacionados con la inmunidad
• ⇰ Aumentar la concentración tiempo-dependiente de proteínas en las células diferenciadas IPEC-1
• ⇰ Causar una respuesta inflamatoria intestinal temprana
• ⇰ Interrumpir la homeostasis intestinal
• ⇰ Inclinar el sistema inmunitario intestinal hacia una respuesta del Th17

Los efectos de la T-2 en el sistema inmunológico del cerdo

Según la EFSA⁵⁸, el cerdo doméstico se encuentra entre las especies más sensibles a los efectos inmunotóxicos y hematotóxicos de las toxinas T-2 y HT-2.

Se ha descrito que la toxina T-2 es inmunotóxica, ya sea por sus atributos citotóxicos, apoptóticos o inmunosupresores.

⇰ Al igual que otros tricotecenos, la toxina T-2 puede ser tanto inmunosupresora como inmunoestimuladora, dependiendo de la dosis y el momento de la exposición.

En diversos estudios se han demostrado los efectos de la toxina T-2 sobre la respuesta inmunitaria, tanto humoral como celular⁵⁹. Además, la toxina T-2^60,61:

• ⇰ Induce la peroxidación de los lípidos, afectando la integridad de la membrana celular
• ⇰ Provoca depleción celular en el tejido linfoide
• ⇰ Inhibe la función de las células inflamatorias
• ⇰ Disminuye las respuestas inmunitarias humorales y celulares, lo que conduce a una mayor susceptibilidad a las infecciones

INHIBICIÓN DE LA SÍNTESIS PROTEICA

La diana molecular más destacada de los tricotecenos es la unidad ribosómica 60S, donde impide la iniciación de la cadena polipeptídica⁶⁶.

⇰ Los estudios in vitro sugieren que la toxina T-2 interactúa con la peptidil transferasa, que es una integrante de la subunidad ribosómica 60S, inhibiendo así la transpeptidación en el proceso de formación de enlaces peptídicos, lo que da lugar a una inhibición de la prolongación y terminación de la síntesis de proteica^62,63.

Los efectos tóxicos producidos por la toxina T-2 y la toxina HT-2 incluyen la inhibición de la síntesis proteica (mediante la unión e inactivación de la actividad de la peptidiltransferasa en el punto de transcripción), lo que afecta también a la síntesis de las inmunoglobulinas y, a su vez, a la inmunidad humoral^67-69.

La exposición a la toxina T-2 provoca leucopenia y depleción celular en los órganos linfoides, lo que perjudica considerablemente la producción de anticuerpos, reduce la respuesta proliferativa de los linfocitos y obstaculiza el desarrollo de las células dendríticas⁷⁰.

Además, puede afectar a las ADN polimerasas, a la desoxinucleotidil transferasa terminal, a la monoaminooxidasa y a varias otras proteínas que intervienen en la coagulación⁷¹.

⇰ Se ha demostrado un efecto perjudicial de la toxina T-2 sobre el ADN, tiempo- y dosis-dependiente, utilizando células mononucleares de sangre periférica de cerdos (incubación con 0,1-1 μM durante 24 o 42 horas)⁷².

Las células dendríticas, las más potentes células presentadoras de antígenos (APC) del sistema inmunitario, han demostrado ser sensibles a los tricotecenos, observándose que la toxina T-2 altera su proceso de maduración⁶⁴.

Además, en un estudio in vitro anterior con macrófagos alveolares primarios de origen porcino, la preexposición de los macrófagos a 3 nM de toxina T-2 disminuyó la producción de mediadores inflamatorios (IL-1β, TNF-α, óxido nítrico) en respuesta al LPS y la disminución de la respuesta proinflamatoria se asoció con una disminución de la expresión del ARNm de TLR.

Así pues, la ingestión de bajas concentraciones de toxina T-2 puede afectar a la activación del TLR al disminuir el reconocimiento de patrones de patógenos, interfiriendo con el inicio de la respuesta inmunitaria inflamatoria frente a los patógenos⁶⁵.

La toxicidad aguda T-2 (1,2 mg/kg de peso corporal por vía intravenosa) se caracteriza por emesis, paresia posterior, apatía y letargo, así como por graves daños en las células que se dividen activamente en la médula ósea, los ganglios linfáticos, el bazo, el timo y la mucosa intestinal. Sin embargo, en 24 horas, los cerdos supervivientes se recuperan y parecen normales^60,73.

En un estudio de alimentación con cerdos, se observó una inmunosupresión (0,5-3,0 mg T-2/kg de pienso).

⇰ Se inmunizó a los cerdos con globulina de caballo, observándose una reducción de la síntesis de anticuerpos esta globulina, así como una disminución dosis-dependiente de los elementos linfoides en el timo y el bazo.

⇰ El recuento de leucocitos y la porción de linfocitos T se redujo en todos los grupos de exposición⁷⁴.

En los cerdos inmunizados con OVA, las dosis subclínicas de toxina T-2 indujeron un aumento temprano y transitorio de la concentración plasmática total de IgA, pero una disminución del título de IgG anti-OVA.

⇰ Los cerdos alimentados con 1,324 o 2,102 mg de toxina T-2 por kilogramo exhibieron una producción reducida de anticuerpos anti-ovalbúmina el día 21 sin alteración significativa de la proliferación de linfocitos específicos⁷⁵.

Frankic et al.³⁷ señalaron que la toxina T-2 (3 mg/kg de pienso durante 14 días en cerdos destetados) aumentaba la cantidad de daño del ADN en los linfocitos en un 27% y disminuía la IgG sérica total.

De manera análoga al efecto sobre la proliferación de los linfocitos, se comprobó que cantidades bajas de toxina T-2 aumentaban los niveles de anticuerpos, mientras que las cantidades altas eran inmunosupresoras60, por lo que se puede observar una mayor susceptibilidad a las enfermedades infecciosas (por ejemplo, Mycobacterium, Staphylococcus, Listeria, Toxoplasma y el virus del herpes simple (HSV-1) – efectos observados en ratas, ratones y pollos)⁵⁸.

Li et al.⁷⁶ explicaron que la supresión del IFN-γ por la toxina T-2 es probablemente uno de los factores responsables de la disminución de la inmunidad antiviral en presencia de la toxina T-2. La supresión del IFN-γ puede deberse a un aumento de la expresión de la IL-6 (interleucina 6).

Aspectos interesantes sobre la interacción entre tricotecenos y el sistema inmunitario

En conclusión, los macrófagos, la IgA y las citoquinas proinflamatorias tienen un papel significativo en los efectos inmunomoduladores de los tricotecenos⁷⁷.

Los mecanismos subyacentes de los efectos del tricoteceno en el sistema inmunitario, como se sugiere en los estudios de Wu et al.^77-79 y Liao et al.⁶², son:

1. Activación de las proteínas quinasas activadas por mitógenos (MAPK)

La teoría más aceptada es que el DON y otros inhibidores de la traslación de la unión al ribosoma pueden activar a las proteínas quinasas activadas por mitógenos (MAPK) mediante un mecanismo conocido como proceso de “respuesta al estrés ribotóxico”³⁰.

⇰ Los MAPKs, que son cruciales para la transducción de señales en la respuesta inmunitaria, median la regulación transcripcional y post-transcripcional de los genes causada por DON.

El DON se une al locus de la peptidil transferasa del ribosoma 28s, lo que activa la respuesta al estrés ribotóxico e induce la fosforilación de la proteína quinasa (PKR) y la quinasa hematopoyética (Hck), y luego desencadena rápidamente la vía de señalización MAPK (así como las vías NF-kB y JAK/STAT), lo que inalmente conduce a la apoptosis celular y a la expresión de citoquinas proinflamatorias⁸⁰.

Además, los tricotecenos regulan las moléculas de señalización relacionadas con la apoptosis, como IL-6, IL-1β y TNF-α.

2. Desencadenamiento del estrés del retículo endoplasmático y la señalización mediada por el calcio

El DON también puede inducir estrés del retículo endoplásmico (RE)⁸¹, así como aumentar la expresión de las proteínas ATF3 y DDIT3 (dos de los principales marcadores de estrés del RE) en un plazo de 3 horas⁸¹.

⇰ Tal como se ha señalado, la sobreexpresión de ATF3 y DDIT3 podría dar lugar a la detención del ciclo celular y/o la apoptosis^82,83.

El DON puede inducir la fosforilación de las proteínas quinasas JNK en las células Jurkat, desencadenando una respuesta de activación de los linfocitos T y la separación de la caspasa-3, un evento conocido por mediar la apoptosis, dentro de las 3 horas después de su exposición⁸¹.

⇰ La caspasa-12 activada puede inducir la activación de la caspasa-9 a través de la escisión directa de la caspasa-9, que a su vez induce la activación de la caspasa-3 y finalmente se produce la apoptosis⁸⁴.

3. Inducción de vías de señalización mitocondrial y apoptosis

El DON también induce la apoptosis al involucrar la vía intrínseca mitocondrial a través de los siguientes mecanismos^85,86:

• ⇰ Apertura del poro de transición de permeabilidad mitocondrial (mPTP)
• ⇰ Pérdida del potencial transmembrana mitocondrial Aumento del O₂^– (anión superóxido)
• ⇰ Liberación del citocromo C

Así pues, la disfunción mitocondrial, a raíz de la liberación del citocromo C en el citoplasma y la activación en serie de las caspasas contribuyen a la apoptosis inducida por DON, posiblemente modulada por la familia Bcl-2⁶².

4. Influencia en la vía de la síntesis de proteínas en las células, como la síntesis de ARN, el funcionamiento del ribosoma y la traducción

El DON también puede aumentar la expresión de microARNs (miRNA) responsables de la inhibición de genes selectivos y la síntesis de los ribosomas⁸⁷.

Además, los tricotecenos reducen considerablemente la expresión del IFN-γ en cerdos y ratones, reduciendo así la resistencia del hospedador a los virus y su capacidad de reparación^19,93, mientras que el DON reduce la expresión del IFN-b y promueve la apoptosis celular⁴⁸.

ESTRÉS OXIDATIVO

El estrés oxidativo es un importante mecanismo de toxicidad asociado a los tricotecenos, ya que altera el funcionamiento normal de las mitocondrias y genera radicales libres, incluidos los ROS.

⇰ Estos compuestos inducen la peroxidación de los lípidos, cambian el estado antioxidante de las células y reducen la actividad de las enzimas antioxidantes como la glutatión-S-transferasa (GST), la superóxido dismutasa (SOD) y la catalasa (CAT)^77,88.

⇰ El daño al ADN también se asocia con la generación de ROS y la peroxidación de lípidos. Algunas vías de señalización, entre ellas MAPK, JAK/STAT y NF-κB, son inducidas posteriormente por el estrés oxidativo, y las vías de apoptosis mediada por caspasas también se activan⁸⁹.

INMUNOMODULACIÓN

El efecto inmunomodulador de los tricotecenos está determinado por el equilibrio entre las vías de señalización de supervivencia y muerte celular^26,88,94.

⇰ La apoptosis celular inducida por la toxina T-2 se inhibe simultáneamente por la vía JNK1-STAT3 (que mantiene la función normal de las mitocondrias) y se promueve por la vía STAT1 en la misma célula⁹⁴.

⇰ El DON inicia tanto una vía de supervivencia (ERK/AKT/p90Rsk/Bad) como una vía apoptótica competidora (p38/p53/Bax/ Mitocondrias/Caspasa-3) en macrófagos RAW 264.7²⁶.

INMUNOESTIMULACIÓN

El efecto inmunoestimulador de los tricotecenos puede estar mediado, en parte, por la autofagia^95,96.

⇰ Según Tang et al.96, la autofagia inducida por DON inhibe la apoptosis inducida por DON de las células epiteliales intestinales al mitigar el daño causado por el estrés oxidativo, lo que hace que la respuesta de las células al estrés falle.

⇰ Según Bin-Umer et al.⁹⁵, la autofagia de las mitocondrias dañadas (mitofagia) desempeña un papel fundamental en la resistencia de las células a los tricotecenos.

EVASIÓN INMUNITARIA

Los tricotecenos tienen un mecanismo de “evasión inmunitaria” que suprime las defensas inmunitarias del hospedador y las inducidas por las vacunas.

⇰ Este mecanismo interfiere con los genes antiapoptóticos, promoviendo la apoptosis inducida por el estrés oxidativo^93,97,98, permitiendo que las toxinas escapen a la reacción del hospedador y a la reparación inmunitaria⁷⁸.

ZEARALENONA

Debido a sus propiedades estrogénicas, el ZEN se une a los receptores de estrógeno (REs) y se asocia típicamente con los trastornos reproductivos en el cerdo⁹⁹.

⇰ Sin embargo, se sabe que el ZEN también produce hepatotoxicidad, hematotoxicidad, inmunotoxicidad y genotoxicidad^45,100.

Dado que las células inmunitarias también expresan REs como REα en las células NK, macrófagos y células T, así como REβ en los monocitos y los linfocitos B101, la ZEN también puede unirse a tales RE y regular una variedad de vías metabólicas de la respuesta inmunitaria¹⁰⁰.

La ZEN no sólo activa los genes relacionados con la respuesta inmunitaria, sino que también interfiere con el sistema inmunitario esplénico, cambian los fenotipos de los linfocitos del bazo e incluso provoca la atrofia de los linfocitos en ratones o ratas^102,103.

Además, la ZEN puede inducir la inmunosupresión al reducir las inmunoglobulinas en el suero y las citoquinas en los órganos linfoides¹⁰⁴.

⇰ Por otro lado, la secuenciación del ARN en muestras de hígado de lechones alimentados con pienso contaminado con ZEN y DON, indicó un efecto sobre la expresión y conjunto de transcritos relacionadas con la inmunidad¹⁰⁵.

RESPUESTA INMUNITARIA HUMORAL

En cuanto a los efectos de la ZEN en la respuesta inmunitaria humoral, un estudio realizado con ratas (5,0 mg/kg de ZEN durante 36 días) reveló que la ZEN sola (sin desafío inmunitario) puede disminuir la producción de inmunoglobulinas¹⁰⁶.

⇰ Además, un estudio in vitro con células mononucleares de sangre periférica (PBMC) de lechones también mostró una disminución de los niveles de inmunoglobulina¹⁰⁷.

⇰ En cambio, en un estudio in vivo realizado por Swamy et al.¹⁰⁸, se observaron mayores concentraciones de inmunoglobulinas séricas (se aumentaron las IgM e IgA, pero no las IgG) en cerdos alimentados con granos contaminados con DON, ácido fusárico (FA), ZEN y 15-acetildeoxinivalenol (15-acetilDON).

⇰ Según otro estudio in vivo realizado por el mismo grupo109 con diferentes concentraciones de las mismas micotoxinas en cerdos, se observó la ausencia de efecto de la dieta en los niveles de anticuerpos IgM e IgG.

CITOTOXICIDAD Y DAÑO OXIDATIVO

Los experimentos in vitro con células Vero y Caco-2 sugieren que la ZEN induce citotoxicidad y daño oxidativo además de su potencial estrogénico¹¹¹.

Además, un estudio in vitro de Taranu et al.¹¹², en el que se investigaban los efectos de la ZEN (10 mM) en la expresión génica de las células intestinales porcinas (IPEC-1), apoyó que, aunque esas concentraciones de ZEN no afectan a la viabilidad celular, el 70% de los 190 genes de expresión diferencial estaban sobreexpresados.

 

⇰ Los genes que codifican las enzimas glutatión peroxidasa (GPx6, GPx2, GPx1) se encontraban entre los más expresados, lo que aportaba pruebas de que las micotoxinas inducen daño oxidativo, mientras que también se revelaba una mayor expresión de las citoquinas implicadas en la inflamación (por ejemplo, TNF-α, IL-6, IL-8) y el reclutamiento de células inmunitarias (por ejemplo, IL-10), demostrando que la ZEN modula las vías de reparación inmunitaria y/o celular de las células intestinales.

METABOLITOS DE ZEN

Marin et al.¹¹³ investigaron los efectos de la ZEN y sus metabolitos, α- zearalenol (α-ZEL), β-zearalenol (β-ZEL), y la zearalanona (ZAN), sobre varias funciones de los neutrófilos como la proliferación, la síntesis de citoquinas y el estrés oxidativo en un modelo de células polimorfonucleares porcinas (PMN).

⇰ Se observó que la toxina parental era menos tóxica, mientras que los derivados de ZEN indujeron una disminución significativa de la síntesis de IL-8 en los PMN de los cerdos.

Se llegó a la conclusión de que la ZEN y sus derivados pueden tener efectos divergentes sobre importantes parámetros de la inmunidad innata de los cerdos, como la viabilidad de las células, la IL-8 y la síntesis de aniones superóxidos. En otro estudio realizado por el mismo grupo¹⁰⁷ con PBMC, 5 y 10 μM de ZEN y ZAN disminuyeron significativamente la síntesis de TNF-α en el sobrenadante del cultivo celular de PBMC, y 10 μM de ZAN disminuyó también la síntesis de IL-8, mientras que el ZEN y sus metabolitos en concentraciones superiores al 5 μM también indujeron una disminución significativa de la concentración de IgG, IgA o IgM.

Una evaluación in vitro posterior de la toxicidad de α-ZEL y β-ZEL en macrófagos RAW264.7¹¹⁴ demostró que la β-ZEL tenía un efecto inhibitorio más fuerte sobre la viabilidad de los macrófagos que la α-ZEL.

β-ZEL también indujo la muerte celular, principalmente por apoptosis en lugar de necrosis, mientras que los otros metabolitos ZEN indujeron:

• ⇰ Pérdida de potencial de la membrana mitocondrial (MMP)
• ⇰ Cambios mitocondriales en las proteínas Bcl-2 y Bax
• ⇰ Liberación citoplasmática del citocromo c y el factor inductor de apoptosis (AIF)

FUMONISINA B

La toxicosis por FB, según el nivel de contaminación y el tiempo de exposición, puede provocar el síndrome de edema pulmonar porcino debido a los efectos tóxicos cardiovasculares, así como un aumento de la relación esfinganina/ esfingosina (Sa/So) en el suero y los tejidos, toxicidad hepática y renal, retraso en la madurez sexual y alteraciones de la funcionalidad reproductiva, deterioro de la respuesta inmunitaria innata y adquirida, lesiones histológicas en los órganos internos, así como alteraciones de la fisiología cerebral.

Debido a su parecido estructural con la ceramida, las fumonisinas inhiben competitivamente las ceramida sintasas (CerS), un grupo de enzimas clave en la biosíntesis de la ceramida y los esfingolípidos más complejos, lo que da lugar a la interrupción de la síntesis de novo de la ceramida, así como al metabolismo de los esfingolípidos y, en consecuencia, a alteraciones en las vías lipídicas115.

INFLAMACIÓN

Las FBs, especialmente la B₁ (FB₁), influyen en la respuesta inflamatoria21,116.

Se ha descrito una reducción de la expresión de citoquinas (IL-6, IL-1β, IL-12p40 y IL-8) en el bazo y un aumento significativo de la expresión de IL-1β, IL-6, IFN-γ y TNF-α en el intestino delgado de los lechones alimentados con dietas contaminadas [ya sea DON (3 mg/kg) o FB (6 mg/kg), o ambos durante 35 días]¹¹⁷.

⇰ Tras la ingestión de 2,8 μM FB1/kg de peso corporal (37-44 mg FB1/kg de alimento), se encontró una disminución de la expresión de la mayoría de las citoquinas en las diferentes porciones intestinales tras 14 días de exposición¹¹⁸.

⇰ Además, 8 mg de FB1/kg de pienso disminuyó la expresión génica de las citoquinas IL-4, IL-6 e IL-10 de Th2 en la sangre de los cerdos^116,119. Algunos de los cambios en la expresión de ARNm de IL1α, IL1β, IL6, IL8, TNFα y MCP-1 inducidos por FB u otras toxinas de Fusarium también podrían estar relacionados con la citotoxicidad¹²⁰.

FUNCIÓN INTESTINAL

En cuanto a la morfología y la función intestinal, las FBs se han asociado con²¹:

• ⇰ Fusión y atrofia de las vellosidades intestinales
• ⇰ Disminución de la resistencia eléctrica transepitelial (TEER), densidad de células caliciformes, y expresión de oclusina y cadherina E
• ⇰ Mayor translocación bacteriana a otros órganos y proliferación de bacterias oportunistas intestinales

Se han demostrado efectos negativos significativos en el sistema inmunitario intestinal (exposición oral a 1 ppm FB durante 10 días, seguida de un desafío con Escherichia coli), que muestran una reducción de la expresión intestinal de IL-12p40, un deterioro de la función de las células presentadoras de antígenos intestinales (APC), una disminución de la expresión de la molécula del Complejo de Mayor de Histocompatibilidad clase II (MHC-II) y una reducción de la capacidad de estimulación de los linfocitos T tras la estimulación¹²¹.

RESPUESTA INMUNITARIA HUMORAL

En cerdos expuestos a FB₁ y vacunados frente al virus de la enfermedad de Aujeszky (Herpesvirus Suid 1 [SuHV1]), la respuesta inmunitaria humoral se vio muy alterada, con una fuerte disminución de los anticuerpos observados¹²².

De forma similar, la exposición in vivo (28 días) de lechones destetados a pienso contaminado con 8 mg de FB₁/kg disminuyó significativamente la expresión del ARNm de la IL-4 por parte de los glóbulos sanguíneos de los cerdos y disminuyó el título de anticuerpos específicos tras la vacunación frente a Mycoplasma agalactiae¹¹⁶.

⇰ En un estudio similar con FB₁ y vacunación frente a Mycoplasma agalactiae, se demostró que los niveles de anticuerpos específicos disminuyeron significativamente después de la vacunación, así como el nivel de expresión de ARNm de la IL-10¹¹⁹.

⇰ En otro estudio se constató una disminución de la expresión de IL-8 en el intestino de los cerdos tras la administración oral de 0,5 mg/kg de FB₁, aunque otras citoquinas no se vieron afectadas¹²³.

Según experimentos in vitro e in vivo, la FB₁ modifica el equilibrio de citoquinas Th1/ Th2 (T-helper 1/T-helper 2) en los cerdos de manera similar a una respuesta humoral alterada^116,119, además de influir en la respuesta inflamatoria.

⇰ La incubación de macrófagos alveolares porcinos con FB₁ condujo a una reducción significativa del número de células viables y a la muerte celular por apoptosis¹²⁴.

⇰ Un experimento in vivo con cerdos [ya sea DON (3 mg/ kg) o FB (6 mg/kg), o ambos durante 35 días] demostró que la IL-8, la IL-1β, la IL-6 y la proteína inflamatoria de los macrófagos-1β disminuían significativamente en el bazo de los lechones expuestos a dietas multicontaminadas (DON y FB), mientras que los animales que sólo recibieron alimentos contaminados con FB demostraron una disminución significativa en la codificación del ARNm para la IL-1b y la IL-6¹²⁵.

AFLATOXINAS

Las aflatoxinas tienen propiedades hepatotóxicas, carcinogénicas e inmunotóxicas, perjudicando tanto la respuesta inmunitaria innata como la adquirida¹²⁶.

La ingestión de aflatoxinas (140 y 280 ppb durante 4 semanas) tiene un efecto bifásico en el número total de leucocitos, de modo que una dosis baja de AF (140 ppb) disminuye el número total de leucocitos, mientras que una dosis alta (280 ppb) tiene el efecto opuesto, además de disminuir la expresión de los mRNA de citoquinas proinflamatorias (IL-1β, TNF-alfa) y aumentar la de los mRNA de citoquinas antiinflamatorias (IL-10)¹²⁷.

⇰ En ese estudio también se observó una reducción de la respuesta inmunitaria inducida por Mycoplasma agalactiae en el grupo tratado con 280 ppm. Además, en lo que respecta a los efectos de la AFB₁ en el proceso inflamatorio, se ha demostrado que la exposición in vitro de los macrófagos alveolares de los cerdos a esta toxina da lugar a una disminución de la viabilidad y la actividad fagocítica de las células de cultivos primarios en función del tiempo y la dosis¹²⁴.

La evaluación de muestras de sangre de lechones de 25 días de edad, nacidos de cerdas que recibieron AF a través del pienso durante la gestación y lactación, demostró la reducción de la respuesta linfoproliferativa a los mitógenos y la incapacidad de los macrófagos derivados de monocitos para producir eficientemente aniones superóxidos tras la estimulación de estallido oxidativo in vitro, mientras que su capacidad de fagocitar glóbulos rojos no se vio comprometida.

⇰ Las células granulocíticas mostraron una reducción de la respuesta quimiotáctica al factor quimioatrayente bacteriano y a la caseína¹²⁸.

La AFB₁ interfiere en el desarrollo de la inmunidad adquirida en los cerdos tras la vacunación frente a la erisipela con una preparación bacteriana (una suspensión de bacterias muertas) de E. rhusiopathiae y aumenta la gravedad de la infección con E. rhusiopathiae¹²⁹.

⇰ Por otra parte, en un modelo de cerdo vacunado con ovoalbúmina (OVA), la exposición a la AFB₁ no tuvo un efecto importante sobre la inmunidad humoral (concentraciones de IgA, IgG e IgM totales y de IgG específicas anti-OVA), pero se detectó un fallo en la activación de los linfocitos¹³⁰.

Los hallazgos de otro estudio¹³¹ sobre la implicación de la AFB₁ en la replicación del virus de la gripe porcina (SIV) in vitro e in vivo, apoyaron que la exposición a la AFB1 acentúa la replicación del SIV, la inflamación y el daño pulmonar al activar la señalización de TLR4-NFkB.

Un estudio con esplenocitos porcinos132 proporcionó pruebas de los mecanismos subyacentes implicados en la inmunosupresión inducida por AFB₁.

⇰ En el estudio, la AFB₁ inhibió la producción de IL-2 en los esplenocitos porcinos, provocando una inmunotoxicidad dosis-dependiente.

Además, la AFB₁ disminuyó el nivel de glutatión reducido (GSH) y aumentó la peroxidación lipídica en los esplenocitos porcinos, lo que va acompañado de un aumento de la fosforilación de ERK1/2.

Además, la AFB₁ altera la inmunidad celular, probablemente por la desregulación de la capacidad de presentación de antígenos de las células dendríticas¹³³.

⇰ Por otro lado, la exposición a AF aumenta la capacidad de inducción de proliferación de los linfocitos T de las por parte de las células dendríticas derivadas de monocitos porcinos, lo que mejora la capacidad de presentación de las células¹³⁴.

OCRATOXINA A

La OTA es un importante agente nefrotóxico, además de tener propiedades hepatotóxicas, así como inmunotóxicas, neurotóxicas y teratogénicas²¹.

RESPUESTA INMUNITARIA HUMORAL

Se describió una perturbación de la respuesta inmunitaria humoral en un estudio in vivo con cerdos (500 μg OTA/kg de pienso durante 3 meses)¹²², ya que se observó una fuerte disminución del título de anticuerpos tras la inmunización frente a la Enfermedad de Aujeszky (Pseudorabia).

Las cerdas jóvenes alimentadas con piensos contaminados con OTA mostraban¹³⁵:

• ⇰ Una reducción de la respuesta de hipersensibilidad de los basófilos cutáneos a la fitohemaglutinina
• ⇰ Una reducción de la hipersensibilidad retardada a la tuberculina
• ⇰ Una disminución del índice de estimulación para la linfoblastogénesis
• ⇰ Una disminución de la producción de IL-2 cuando los linfocitos fueron estimulados con concanavalina A
• ⇰ Una disminución del número y la actividad fagocítica de los macrófagos

La aparición espontánea de una infección clínica por Salmonella choleraesuis relacionada con la dosis se produjo en lechones alimentados con 1 y 3 mg de OTA/kg de pienso¹³⁶.

⇰ En otro experimento realizado por el mismo grupo, se vacunó a los lechones frente a S. choleraesuis, la ingestión de OTA (1mg de OTA /kg de pienso) provocó infecciones espontáneas de Brachyspira hyodysenteriae y Campylobacter coli que se asociaron a la inmunosupresión inducida por OTA, mostrando una respuesta retardada al antígeno y una respuesta humoral reducida¹³⁶.

⇰ Por el contrario, en un estudio anterior¹³⁵, la OTA (2,5 mg de OTA/kg de pienso durante 35 días) no tuvo ningún efecto en las concentraciones de inmunoglobulina total y específica.

EXPRESIÓN DE CITOQUINAS

La OTA también afecta a la expresión de citoquinas.

Un experimento realizado con lechones destetados que ingirieron una dieta contaminada con OTA (181 ng/g de pienso) mostró un aumento del nivel de TNF-α y de IL-10 en plasma, con una menor capacidad de responder con la expresión de citoquinas en un desafío ex vivo con lipopolisacáridos (LPS)¹³⁷.

Hay evidencias, principalmente de estudios in vitro, de los efectos de la OTA sobre los neutrófilos y los macrófagos, incluido el estrés oxidativo, la apoptosis, la fosforilación del ERK1/2 y la liberación de TNFα por las vías del NF-kB¹³⁸.

En un estudio sobre la toxicidad de las micotoxinas de Penicillium en la proliferación de linfocitos inducida por mitógenos, se observó que la OTA era el inhibidor de la proliferación celular más potente (50% de inhibición a 1,3 mM)¹³⁹.

Además, se ha señalado que la OTA induce la fosforilación de P38 y ERK1/2 en los macrófagos alveolares porcinos, causando inmunotoxicidad mediante un aumento de las proteínas de la vía de señalización inflamatoria mediada por el receptor Toll-like 4 (TLR4) y una elevada producción de ROS intracelular¹⁴⁰.

También se ha descubierto que la OTA modula la expresión de los microARN, en particular en las células renales in vivo e in vitro. Muchos de los miARNs alterados están involucrados en las vías de señalización del MAPK¹³⁸.

La OTA también induce la fosforilación de P38 y ERK1/2 en los esplenocitos de los cerdos, lo que produce nefrotoxicidad e inmunotoxicidad, respectivamente¹⁴³.

Según los enfoques proteómicos, el aumento de la expresión de las proteínas mitocondriales que participan en el transporte de electrones, la síntesis de proteínas, la respuesta al estrés y la muerte celular y la modulación de las proteínas que participan en la inflamación son factores relacionados con la toxicidad de la OTA^144,145.

Además, se ha descrito una disminución de la viabilidad de los linfocitos T inducida por TCR en los linfocitos de la sangre periférica y esplenocitos (400, 800 μg/kg dieta) en cerdos¹⁴⁶. Así pues, se sugiere que la nefrotoxicidad y la inmunotoxicidad de la OTA podrían involucrar estrés del RE, activación de la señalización MAPK y autofagia^143,146.

Observaciones finales y notas prácticas

Se considera que los hongos son la mayor amenaza para la salud animal y vegetal entre todas las clases taxonómicas de patógenos147.

Las investigaciones actuales han proporcionado evidencias claras de que las micotoxinas afectan al sistema inmunitario de los cerdos.

El intestino es, sin duda, el eslabón clave entre las micotoxinas ingeridas y los efectos perjudiciales para el animal.

⇰ Los efectos negativos de las micotoxinas en el intestino (por ejemplo, la reducción de la integridad de la barrera) y en el sistema inmunitario implican que pueden desempeñar un papel fundamental en el inicio, la progresión y la duración de las infecciones intestinales (y sistémicas).

⇰ Por lo tanto, al comprometerse la integridad intestinal también aumentará la probabilidad de que los microbios o productos microbianos, o micotoxinas, entren a la circulación e induzcan enfermedades sistémicas^148-150.

Los amplios efectos inmunosupresores de las micotoxinas pueden disminuir la resistencia del huésped a las enfermedades infecciosas20, mientras que la respuesta inmunitaria de las vacunas también se altera con dosis de micotoxinas que no alteran la respuesta inmunitaria global^75,116,130.

⇰ Tal alteración de la inmunidad vacunal puede provocar la aparición de la enfermedad, incluso en grupos vacunados adecuadamente. Estos casos son de gran importancia cuando se investiga la efectividad de los programas de vacunación en las granjas.

Además, los casos de contaminación de los piensos con mezclas de micotoxinas deben ser considerados más probables que la contaminación con una sola micotoxina en condiciones de campo.

⇰ Los efectos de las mezclas de micotoxinas en el sistema inmunitario de los cerdos aún no se han aclarado por completo.

⇰ En cuanto a la reducción de la proliferación de linfocitos en estudios in vivo, se ha sugerido un fenómeno de aditividad tras la exposición conjunta a las toxinas AF y FB u OTA y T-2, y de sinergismo tras la exposición conjunta a FB y DON¹⁵¹.

Para comprender mejor la complejidad de las interacciones, la exposición conjunta in vivo a FB y DON dio lugar a una interacción sinérgica en la proliferación de linfocitos tras la estimulación mitogénica, una interacción aditiva en la expresión de citoquinas (IL-8; IL-1b, IL-6 y la proteína inflamatoria de los macrófagos 1b) y una interacción antagónica en los niveles de expresión de IgA y citoquinas específicas¹²⁵.

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