OBJETIVO
Este abstract presenta un método de análisis y preparación de muestras multimicotoxinas para la detección de micotoxinas emergentes y reguladas por la UE mediante UHPLC-MS/MS Agilent 6460c.
MATERIALES & MÉTODOS
El método se basa en el principio de “diluir e inyectar” (“dilute and shoot”).
La preparación de la muestra requiere:
- 1. Extracción con un disolvente orgánico.
- 2. Centrifugación de los extractos.
- 3. Para compensar los efectos de matriz en la ionización por electrospray, los extractos se mezclan con patrones internos marcados isotópicamente (9) para cada grupo de micotoxinas.
⇰ La adición del patrón interno se realiza en la aguja del automuestreador, antes de la inyección en el UHPLC-MS/MS.
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La validación del método en términos de linealidad, selectividad, sensibilidad, exactitud y precisión se realizó en 8 matrices de piensos complejos (maíz, piensos compuestos, trigo, cebada, harina de soja, salvado de trigo, harina de girasol, ración mixta total) para detectar 34 micotoxinas:
![](https://mycotoxinsite.com/wp-content/uploads/2024/07/LC-MS.png)
- ⇰ Aflatoxinas B1, B2, G1, and G2
- ⇰ α – zearalenol, β – zearalenol, zearalanona y zearalenona
- ⇰ Diacetoxiscirpenol
- ⇰ Toxin HT-2 y toxina T-2
- ⇰ Neosolaniol
- ⇰ 3-acetil deoxinivalenol, 15- acetil deoxinivalenol, deoxinivalenol y deoxinivalenol-3-glucosido
- ⇰ Nivalenol
- ⇰ Fumonisinas B1, B2, and B3
- ⇰ Ácid fusarico
- ⇰ Moniliformina
- ⇰ Fusarenon X
- ⇰ Ocratoxina A
- ⇰ Beauvericina
- ⇰ Enniatinas A, A1, B y B1
- ⇰ Citrinina
- ⇰ Patulina
- ⇰ Ergosina
- ⇰ Ergocriptinins
- ⇰ Alternariol
Los límites de cuantificación (LOQ) fueron de 0,05 ngmL-1 a 4 ngmL-1.
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RESULTADOS Y CONCLUSIONES
RESULTADOS Y CONCLUSIONES
Las recuperaciones de las 34 micotoxinas detectadas en las 8 categorías de piensos se situaron entre el 65,5% y el 125,7% tras la corrección del patrón interno, con desviaciones estándar relativas (RSD) inferiores al 15,1%.
Los resultados demuestran la robustez de este método para el análisis de 34 micotoxinas mediante LC-MS/MS.
![](https://mycotoxinsite.com/wp-content/uploads/2024/07/LC-MS-MS.png)
La aplicación de programas de control eficaces y de normativas legales estrictas puede contribuir significativamente a la reducción y arrastre de estas micotoxinas en la cadena alimentaria.
![](https://mycotoxinsite.com/wp-content/uploads/2024/07/Mould-2.png)
Autores
Hunor Farkaš, Svetlana Ćujić, Jog Raj, Zdenka Jakovčević y Marko Vasiljević
PATENT CO, DOO., Vlade Ćetkovića 1A, 24 211, Mišićevo, Serbia
45th Mycotoxin Workshop, June 2–5, 2024, Vienna, Austria