Detección de las micotoxinas
y métodos de análisis
Las micotoxinas son metabolitos secundarios, de bajo peso molecular y desafortunadamente los ensayos para micotoxinas encierran diferentes problemas que abarcan desde contar con un laboratorio perfectamente bien equipado, en cuanto a instrumentación y capacidad analítica y personal con la sufi ciente experiencia en el manejo de muestras y estándares de referencia.
Las micotoxinas se detectan y cuantifi can comúnmente en el alimento utilizando ensayos basados en anticuerpos y técnicas de cromatografía.
MÉTODOS INMUNOQUÍMICOS
Las micotoxinas no son antigénicas por lo que los primeros estudios que se desarrollaron se enfocaron en cómo lograr la conjugación con proteínas o polipeptidos que pudieran servir como transportadores en las condiciones óptimas de producción de anticuerpos en conejos y en otros animales.
Se han desarrollado diferentes tipos de inmunoensayos entre los que destacan los sistemas:
- ELISA (ensayos inmunologicos de enzimas ligadas)
- RIA (radioinmunoensayos)
- Columnas de inmunoafinidad
TEST DE ELISA
El ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) es un ensayo basado en anticuerpos que se usa comúnmente para detectar micotoxinas.
Unos métodos asequibles
Se encuentran disponibles varios kits ELISA comerciales para Aflatoxinas, Desoxinivalenol, Fumonisinas, Ocratoxinas y Zearalenona.
Se encuentran disponibles varios kits ELISA comerciales para Aflatoxinas, Desoxinivalenol, Fumonisinas, Ocratoxinas y Zearalenona.
Un métodos asequibles
Cromatografías y espectometrías
El empleo de las técnicas cromatográficas requiere de una preparación previa de la muestra, empleándose diferentes métodos de extracción y purifi cación dependiendo de las micotoxinas a analizar y de la matriz alimentaria, como por ejemplo las columnas de inmunoafi nidad u otros procedimientos basados en la extracción sólido-líquido (Quechers, DMFS, etc.) o líquido-líquido (DLLME).
La cromatografía de líquidos de alto rendimiento (HPLC) y la cromatografía de gases / espectrometría de masas (GC / MS) son dos de los métodos más utilizados para la detección y cuantifi cación de micotoxinas.
CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTA RESOLUCIÓN
CROMATOGRAFÍA DE GASES
TÉCNICAS ESPECTOMÉTRICAS DE ABSORCIÓN Y EMISIÓN
ESPECTOMETRÍA DE MASAS
CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA ACOPLADA A UN DETECTOR DE ESPECTOMETRÍA DE MASAS EN TÁNDEM
La cromatografía líquida combinada con espectrometría de masas en tándem (LC-MS/ MS) es hoy en día, el “estándar de oro”para la evaluación de micotoxinas y la forma más confiable para su cuantificación.
Prevención de micotoxicosis