Transformación de
Aflatoxina B₁ y Zearalenona
mediante una
lacasa avanzada de alto potencial redox

Las micotoxinas son el mayor desafío para los productores de alimentos para animales, siendo necesario el monitoreo y la remediación regular.

Las micotoxinas pueden ser remediadas mediante varios métodos, pero las enzimas y los microorganismos para desactivar las micotoxinas se están popularizando actualmente.

Recientemente hemos diseñado una lacasa de alto potencial redox mediante ADN recombinante para mejorar su termoestabilidad y rango de afinidad por los sustratos.

En el presente estudio, hemos evaluado la transformación de micotoxinas usando la lacasa avanzada, la variante DooKu.

1. INCUBACIÓN

El Desoxinivalenol (DON), la Aflatoxina B1 (AFB₁) la Zearalenona (ZEN), la toxina T-2, la Ocratoxina A (OTA) y la Fumonisina B1 (FB₁) (2 ppm) se incubaron con 500 µl de la enzima DooKu (Lacasa)  a 37°C; con siringaldehído (10mM) como mediador redox durante 1 hora.

2. CUANTIFICACIÓN

Tras la incubación, las muestras se centrifugaron y analizaron mediante un método de multi-micotoxinas por LC-MS/ MS para la cuanti icación de todas las micotoxinas (A latoxina B1, Ocratoxina A, Zearalenona, Deoxinivalenol, FB1 y toxina T-2).

Se examinaron diferentes variantes de Lacasas, estando la Lacasa 240 entre las mejores enzimas para la transformación de AFB1 y ZEN como se muestra en la Tabla 1.

El siringaldehído demostró ser mejor cofactor en comparación con TEMPO.

El efecto del pH fue estudiado realizando ensayos a pH 3.0, 4.0, 5.0 y 6.5.

⇰ La Lacasa 240 logró un 73% de transformación para AFB1 a pH 6.5 y un 99% de transformación de ZEN a pH 5.0 como se muestra en la Tabla 2.

También se estudió el efecto del tiempo de incubación, como se muestra en la Figura 1.

La ZEN se transformó en 2 horas, mientras que la AFB₁ se transformó en 3 horas.